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Um dos exame para infertilidade que oferecemos é a fragmentação do DNA, um dano causado ao DNA do espermatozoide que não o altera estruturalmente e nem numericamente, mas interfere na correta leitura das informações nele contidas. São diversas as formas de fragmentação do DNA assim como as suas causas. Dentre as causas se destacam a ação de tóxicos ambientais, a varicocele, a radiação, a quimioterapia e os radicais livres ou espécies oxidativas reativas (ROS) no epidídimo. Também são vários os testes diagnósticos para sua detecção, cada um abordando um aspecto da fragmentação. São testes de fragmentação do DNA mais comumente utilizados o SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay), o Comet, TUNEL e o SCD (Sperm Chromatin Dispersion).
Na clínica MF Fertilidade Masculina utilizamos o método TUNEL, análise por citometria de fluxo e o SCD (Sperm Chromatin Dispersion).
Mas qual a diferença entre as técnicas?
O método TUNEL é realizado através de citometria de fluxo onde as células são analisadas por um laser e marcadas com fluorescência. Esta técnica é muito precisa e permite a análise de mais de 10.000 mil células por amostra. A análise é feita diretamente na fragmentação da fita do DNA por um marcador específico.
O método SCD (Sperm Chromatin Dispersion) consiste na confecção de uma lâmina que será analisada por microscopia óptica. Neste método é analisada a dispersão da cromatina. É uma técnica menos precisa pois são analisadas menos células e de uma forma mais subjetiva, pois o analista fará a constatação observacional a respeito do aspecto do DNA.
A geração de espécies reativas do oxigênio (ROS) é inevitável para organismos aeróbios e, em células saudáveis, ocorre de maneira controlada. Sob condições de estresse oxidativo, a produção de ROS é dramaticamente aumentada, resultando em alterações subsequentes em lipídios da membrana, proteínas e ácidos nucléicos. O dano oxidativo nestas moléculas está associado com uma variedade de eventos patológicos.
ROS são os principais iniciadores de peroxidação lipídica e os ácidos graxos poliinsaturados ligados à membrana são seus maiores alvos. Espermatozoides são células ricas em ácidos graxos poliinsatirados. Os subprodutos da peroxidação lipídica causam danos diretos às membranas celulares dos espermatozoides.
Detecta a apoptose (morte celular programada) em espermatozoides. Neste teste é possível fazer a detecção de moléculas na superfície citoplasmática da membrana celular que indicam o processo de apoptose e, também, da integridade da membrana. Com isso é possível estimar qual percentual de células está entrando em apoptose, o que pode ser indicativo de estresse oxidativo.
Este teste avalia a funcionalidade das mitocôndrias, que são organelas cuja função fisiológica é gerar ATP (energia) através da cadeia respiratória para os espermatozoides. A perda significativa do potencial de membrana das mitocôndrias torna a célula esgotada de energia e posteriormente leva à morte celular. Na cadeia respiratória são produzidas espécies reativas de oxigênio (ROS), que desempenham papel fisiológico. No entanto, disfunções das mitocôndrias podem causar desequilíbrio entre a produção de ROS e mecanismos antioxidantes, provocando estresse oxidativo, prejudicial para os espermatozoides, levando a perda do potencial de membrana mitocondrial.
O teste para detecção do receptor de ácido hialurônico (CD44) em espermatozoides, funciona para identificar espermatozoides maduros, já que somente estes apresentam em sua cabeça, receptores que se ligam ao ácido hialurônico. Espermatozoides maduros estão relacionados a menor índice de fragmentação de DNA.
O acrossomo, localizado na cabeça do espermatozoide, é uma organela que contém as enzimas que digerem a zona pelúcida do oócito, permitindo sua entrada. A liberação dessas enzimas é fundamental para a fertilização e tal processo denomina-se reação acrossômica. A habilidade de realizar a reação acrossômica é necessária para a fertilização normal. Alguns pacientes podem ter análises de sêmen normais, mas os espermatozoides podem apresentar alterações na estrutura do acrossomo ou na capacidade de responder ao estímulo para a reação acrossômica. Nossa análise é realizada por citometria de fluxo com anticorpos monoclonais contra o antígeno acrossômico CD46, utilizando-se um indutor da reação acrossômica para testar a competência de espermatozoides para realizar a reação acrossômica.
A possibilidade da formação de anticorpos contra os espermatozoides torna o fator imunológico uma das causas de infertilidade do homem. A auto-imunidade para os espermatozoides ocorre numa pequena proporção de indivíduos, especialmente nos casos de lesões obstrutivas, inflamatórias, ou traumáticas do trato genital masculino (Dondero e cols., 1984; Zanchetta e cols., 1984). A presença de anticorpos antiespermatozoides ocorre no soro de aproximadamente metade dos homens vasectomizados.
Estes anticorpos interferem em diversas etapas do processo de reprodução humana e reduzem as chances de fertilização, pois prejudicam a funcionalidade do espermatozoide através da aderência à sua membrana plasmática, podendo restringir sua motilidade, bem como gerar aglutinação entre eles.
Este teste é indicado quando o sêmen apresenta aglutinação ou quando há grande porcentagem de espermatozoides imóveis sem causa aparente (vitalidade normal).
O painel andrológico tem o objetivo de avaliar todos os fatores ou características seminais que podem indicar um comprometimento da fertilidade ou saúde do homem.
Através da análise dos principais aspectos da amostra, como: número de células, motilidade, morfologia e concentração, o especialista tem o ponto de partida para iniciar a investigação.
O painel andrológico também fornece informações mais aprofundadas, como a pesquisa de anticorpos no sêmen, fragmentação de DNA, ácido hialurônico e reação acrossômica.
A presença de espécies reativas do oxigênio (íons de oxigênio, radicais livres e peróxidos) em excesso no sêmen, chamado estresse oxidativo, causa dano a membrana celular dos espermatozoides, assim como ao DNA e muitas vezes, leva os espermatozoides a morte celular chamada apoptose. Estas substâncias, que usualmente estão presentes em pequena quantidade no sêmen, podem ser originadas pela respiração dos espermatozoides e por glóbulos brancos no sêmem e são importantes para o bom funcionamento dos espermatozoides. Geralmente, elas são contrabalançadas pela presença de antioxidantes levando a um equilíbrio do balanço oxidativo. Quando ocorre um desequilíbrio deste balanço oxidativo com o aumento das ROS (estresse oxidativo), os espermatozoides ficam expostos a estas moléculas, o que pode levar a um dano funcional irreversível. São várias as causas que podem levar a este desequilíbrio como: infecções, o excesso de células germinativas jovens ou espermatozoides anômalos, varicocele, drogas, metais pesados (chumbo e cádmio), fumo e outros.
Realizamos esta análise no sêmen e no sangue sob o ponto de vista do estresse oxidativo e inflamação crônica, para uma avaliação tanto a nível sistêmico quanto a nível celular.
As IST são infecções transmitidas na maioria das vezes por contato sexual sem preservativo com pessoas contaminadas.
As infecções sexualmente transmissíveis podem causar danos significativos ou até irreversíveis no trato reprodutor masculino e feminino, além de causar danos em todo organismo.
Em alguns casos as infecções dessa natureza podem se manter silenciosas e somente descobertas no momento onde o casal busca a gravidez.
O painel IST é uma ferramenta importante para diagnóstico e restabelecimento da saúde e fertilidade.
É importante enfatizar que antes de tudo o casal deve buscar saúde e qualidade de vida, aliada aos planos de gerar filho(s).
Tipos de exames oferecidos:
Painel IST – PCR no sêmen ( Trichomonas, Ureaplasma, Mycoplasma, Neisseria, Chlamydia) e espermograma.
Exoma completo:
Análise de alterações do número de cópias (CNV).
O Sequenciamento Completo do Exoma (SCE, do inglês Whole Exome Sequencing, WES) ou apenas “Exoma” é um exame de Sequenciamento de Nova Geração (Next Generation Sequencing, NGS) que analisa simultaneamente quase todos os éxons do genoma humano, ou seja, busca alterações genéticas em toda a região codificante do genoma humano e que permite a análise genética efetiva de numerosas doenças associadas à infertilidade masculina ou subfertilidade. Este exame de alta complexidade busca alterações genéticas causadoras de distintos quadros clínicos, sendo direcionada pela história clínica e familiar do paciente. O diagnóstico relaciona estas características genéticas com a condição clínica. Antes de chegar aos testes genéticos mais amplos que existem no mercado, é fundamental consultar um especialista para receber atendimento personalizado e obter um direcionamento sólido quanto ao momento e situação que compete a realização de testes genéticos.
Avaliação dos parâmetros descritivos clássicos de uma amostra de sêmen, ajudando na investigação de possíveis causas da infertilidade.
A análise seminal ou espermograma é a pedra fundamental para a avaliação da saúde do aparelho reprodutor masculino. Entretanto, ele não é um atestado de fertilidade. Isto porque a gravidez não depende somente da qualidade seminal, mas de diversos outros fatores incluindo a fertilidade da parceira. A análise seminal não é um exame fácil de ser realizado e nem de ser interpretado corretamente. É importante que o médico ao solicitar o espermograma conheça a metodologia e os procedimentos que o laboratório que está realizando o exame adota, para que possa interpretá-lo com mais precisão.
O que é analisado no espermograma:
Análise realizada na urina de homens que têm ejaculação retrógrada, ou seja, sente que está ejaculando, mas a maior parte ou todo sêmen vai para bexiga, também referida como ejaculação seca. Esta condição é confirmada quando se encontra espermatozoides em uma amostra de urina obtida imediatamente após a ejaculação.
O analista faz a análise na urina a fim de encontrar espermatozoides na amostra e realizar a análise seminal completa.
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